Определяне на изоелектричната точка на протеини - studopediya

Отделяне на албумин и глобулин протеини яйце belka.Vysalivanie

Изсолване се отнася до изолирането на процеса на протеини от водни разтвори на неутрални соли на концентрирани разтвори на алкални и алкалоземни метали. При добавяне на големи концентрации на сол на дехидратация на протеинов разтвор се случва протеинови частици и отстраняване заряд, протеините се утаяват. Степента на загуба на протеин в утайката зависи от йонната сила на утаител, размерът на частиците на протеиновата молекула, стойността на заряда, хидрофилност.

Други протеини се утаяват при различни концентрации на соли. Следователно, в утаяването получено чрез постепенно увеличаване на концентрацията на сол, отделните протеини са открити в различни фракции. Изсолване протеини е обратимо, и след отстраняване на соли протеин възвръща естествените си свойства. Следователно осоляване използвани в клиничната практика за разделяне на кръв серумни протеини, както и за изолиране, пречистване на различни протеини.

Материалът за изпитване. яйчен белтък.

Оборудване: епруветки, пипети.


Извършване на работата. Леярската тръба 20 капки от неразреден яйчен протеин, равен обем от наситен разтвор на амониев сулфат, съдържанието се разбърква. Тя получава полунаситен разтвор на амониев сулфат, утайка яйце глобулин а. След 5 минути утайката се отфилтрува. Филтратът е друг протеин - яйчен албумин. За осоляване албумин да се прибавя филтратът амониев сулфат прах се смила до пълно насищане, т.е. толкова дълго, докато не допълнително сол разтваряне. албумин утайка се отфилтрува и филтратът се прави биурет реакция. Отрицателна реакция показва липса на протеина.

Клирънсът. Резултатите са влезли в таблицата.

Осоляване-от утаяване на протеини

Изоелектричната точка е определена стойност на рН, при което протеинът е под формата на неутрални молекули (в тяхната изоелектрична състояние) провеждане на равни количества от положителни и отрицателни заряди. С други концентрации на водородните йони в разтвора са за предпочитане и двата положителни и отрицателни йони протеин. Разтвори на протеините в изоелектричната точка на най-малко стабилни и лесно да се утаяват.

За повечето протеини, изоелектричната точка е в близост до неутрални условия, но не напълно съвпада с това, много протеини, той се премества към киселина страна, и някои протеини имат изоелектрична точка при леко алкална реакция на средата. Определяне на изоелектричната точка може да се намали до определяне на рН, при която има най-бърза и пълна загуба на протеин в утайката.