ELISA анализ - имуносорбентен кръвен тест, който е препис, диагностика и как е

Имуносорбентен анализ (ELISA) - е модерен начин за признаване на огромен брой патогени се основава на способността на човешкото тяло за получаване на така наречените антитела в отговор на откриване на чужди вещества - антигени.

В момента се използва тест ELISA кръв:

• за диагностициране на множество полово предавани болести;
• за идентифициране на предразположение към някои заболявания, причинени от наследство;
• за идентифициране на определен етап на болестта;
• за мониторинг на ефективността на лечението.

Например, широко, този метод е получил диагноза на следните заболявания:

Що се отнася до общата медицинска практика, в този случай изпитването на имуноензимен кръвното ви позволява да:

• идентифициране ендокринни патологии, такива като диабет;
• оценка на вероятността за получаване на удар или сърдечен инфаркт;
• За да разберете как и системите на организма;
• разкрива присъствието на алергични реакции;
• оценка на работата на имунната система;
• оценка на състоянието на репродуктивните функции на тялото.

Материал за изследване в този случай може да бъде или венозна кръв или течност в багажника на гръбначния мозък, стъкловидното тяло секреция, околоплодна течност.

Имунната и ензимни реакции

Както ясно следва от наименованието, ELISA анализ на кръв включва няколко компонента, а именно - имунни и ензимни реакции.
Имунният отговор позволява на клетката да се свързва клетки и патогени и ензим дава възможност да се визуализира и оценка на резултата от предишната реакция.

Да разгледаме всяка реакция в по-големи подробности.

Какво е имунна реакция?

Наречен имунни специфични отговори, които позволяват антигенът да се свързва с антитялото и да се създаде имунен комплекс. Какво означава това? Първо, трябва да се разбира, че всяка клетъчна повърхност съдържа молекули, които съдържат данните на клетката, наречен антигени, и се разделят на:

Индивидуални антигени, въпреки някои прилики, има и много разлики. Те са на разположение в даден организъм и никога не са еднакви в други. Специфични антигени могат да бъдат открити в организма на някои видове живи същества. Например, маймуни, коне и кучета имат своя собствена, без значение какво не ви харесва антиген. Ето защо този вид антигени се използва от имунната система да разпознава своите собствени и други клетки, които, строго погледнато, е в основата на имуносорбитен тест свързан с ензим в кръвта.

Как да разпознаем антигени? Тук всичко е съвсем ясно. По-просто казано, клетката, която е имунизирана, хваща клетка, която я накара "подозрение", и го сравнява с антигена в паметта на съществуващата описанието. Ако повишението на антиген се съмнява клетки съответства на това, имунната клетка "пусна" и това продължава. Ако описанието е различен, реакция на организма към заплахата от една - унищожение. Освен това, признаването на "врага" в този случай е равна на почти 100%.

Какво е антитяло?

Присъщо антитяло, което има голямо значение, когато се използва метода ELISA е специална молекула съществуващ на повърхността на имунните клетки, и позволява на последната да се свърже с антигени въпрос микроорганизми. То е антитяло служи като ръководство на данни за оценка на заплахата, и че тя получава сигнал за това, което е съмнително клетка - си или чужд. Ако клетката е заловен "своята" антигена произвежда и пуска своя "любовница".

Защо необходимостта от имунен комплекс?

Както бе споменато по-рано, при признаването на чужди клетки антитялото не позволява на чуждестранни клетъчен антиген. Напротив, чрез изпращане на определени сигнали, той призовава за помощ "укрепване". В този случай ние говорим за факта, че всички други антитела, намиращи се в друга част на клетката, която е имунизирана, започват да се движат в района, е сигнал за опасност, и се свързва с заловен антиген, фиксиране и е заобиколен от всички страни. След антиген ще бъде напълно заобиколени от това започва унищожаването на чужд микроорганизъм.

Антителата, които разкриват ELISA диагностика, са белтъчни структури - имуноглобулини са разделени на няколко вида:

Въпреки това, за диагностика приема само един вид антитяло, което е най-специфично за неизвестен микроорганизма. Обикновено, такива антитела са видове, IgG и IgM.

Какво е ензимната реакция?

Това се нарича ензимна реакция позволява материал към друга страна един. Материал, който действа в кръвта чрез изследване ELISA се нарича "основа", и материала, получен от ензима се нарича "реакционният продукт". Освен това, характеристиките на този процес са, които засягат специално ензим може изключително за конкретен субстрат. Такива ензимни свойства се определят от своя "собствен" субстрата се нарича "афинитет". Въз основа на изложеното по-горе, е изключително ясно, че всеки ензим, свързан единствено едно, че е специфично само за неговия отговор.

Трябва да се отбележи, че методът за диагностика включва използването на IFA не повече от десет вида ензимни реакции, които се образуват поради kolorirovannye вещество, което позволява да се използва за определяне на концентрацията на метод химична реакция агент - колориметрия.

Какво е колориметрия?

Колориметрия - метод за измерване на концентрацията на веществото в зависимост от които е оцветяване плътност на разтвора, което предполага използването на специално предназначени за това устройство - колориметър.

Освен това, в този случай има две вариации на цвят плътност в зависимост от концентрацията на разтвора:

• пряко пропорционална;
• обратно пропорционална.

В първия случай цвета на плътността на разтвора се увеличава с увеличаване на концентрацията му в секунди разтвор същото оцветяване плътността намалява с увеличаване на концентрацията. Технически погледнато, това се прави по следния начин. Взети повече разтвори, вещества с определена концентрация, измервания са направени от тяхната плътност и след това изгражда графика на цвят плътността на концентрацията на разтвора. оцветяване плътност на разтвора за изпитване след това се измерва, и графика е изграден в точна стойност на концентрацията, която е в съответствие с измерената цвят плътност на разтвора.

Се използва за измерване след еднократно колориметри калибриране, способни да изградят на калибровъчната крива, да остане в паметта им, и им позволява да работят в автоматичен режим. Трябва да се отбележи, че в ELISA кръв, обикновено се използват ензими, такива като авидин, пероксидаза или алкална фосфатаза.

Методи за ELISA

В зависимост от начина на провеждане на проучване EIA е разделена на предна и задна. Помислете за всеки един от методите по-подробно.

Какво е "директно свързан имуносорбентен анализ"?

Директен ензимен имуноанализ включва използването на антитела към определен антиген свързан специална марка, която е реакция на субстрата, носещ ензимна природата. Съответно, директен ELISA - анализ на изпускателния пациент биологичния материал се поставя в кладенчетата, последвано от прибавяне на антитела към антиген на заболяване.

Така се прибавя откриване на сифилис антитела към ямките срещу сифилитичен антигени, получени при производството и закупени от лабораторията. Получената смес се оставя в продължение на времето, необходимо за улавяне на антитяло "своята" антиген. Освен това, както е споменато по-горе, антитела задействат реакцията, и се свързват със специфичен маркер.

Поради това, че антитялото се добавя към много хора, не всички от тях ще бъде в състояние да улови антигена в случай на разположението си в извадката. За да се освободи от излишък на антитяло, течността се излива от ямките. Антителата също свързани към антигените са на повърхността. След това се пристъпи към втората част от анализа на ELISA - ензим реакция. Ензимният разтвор се добавя към ямките и се оставя там в продължение на половин час или час. Естествено, етикетът е подобен на добавен ензим, свързване на антитялото. В края на реакцията в кладенеца е вещество, придобили съответен цвят.

Цветна вещество изследва колориметър. Освен това, тъй като етикетът е наличен в кладенеца, вече контактува с антитялото, концентрацията на образувания оцветяване вещество там ще съответства концентрация на антитяло, подобен по размер на броя на антигени. По този начин анализът ни позволява да разберем каква част от откритите микроорганизми или хормони, които се съдържат в оттеглени проба.

Какво е косвен имуноензимен?

Непряко тест кръв за EIA се провежда в 2 фази. В първия етап се използва небелязано антитяло добавен за определяне на желаните антигени, а вторият - белязано антитяло към небелязаното първичното антитяло. По този начин е възможно да се извърши двойно контрол на реакцията:

• антитяло комуникира с антигена;
• тези антитела се свързват с антителата, свързани с антигена.

Анализът се извършва по следния начин. Пациентът е взето биологичен материал се въвежда в ямките и се оставя, докато антигените не се спазват тяхната повърхност. След това, към нея се прибавят небелязано антитяло и се оставя в продължение на времето, необходимо за да се свържете с наличните антигени чрез поставяне на желания имунен комплекс. След процеса на свързване приключи, излишък антитяло се отстранява чрез изливане на течност от ямките.

В края на този процес, са взети антитяло (белязано) следното, се добавят към ямките и се оставя в продължение на времето, необходимо за образуване на комплекс от 2 антитела и антиген. След това разтворът се излива като (за да се отстранят нежеланите антитела).

В следващата стъпка индиректен ELISA анализ на кръв, въведена ензим, който превръща "етикети" в вещество с цвят. Оцветяването в този случай са необходими пет минути до половин час. След развитие на цвят произвежда колориметрия и концентрацията на разтвора с цвят. Тъй като тази стойност в този случай съответства на концентрацията на антитела с етикети, която е равна на концентрацията на антиген в края на проучването може да получите представа за количественото съдържание на причинителя.

Как декодирано кръвни тестове ELISA?

В днешния свят на анализ медицина препис от ELISA на кръв не само може да се диагностицира заболяването, но и да се разбере какво състояние се намира от вида на антитяло, налично в момента, в организма. Така само един анализ за определяне на остра или хронична фаза на болестта. Например, присъствието на IgM антитела показва, че заболяването е в остър стадий на потока.

Този тип антитяло се случва веднага след инфекция и са само болен човек на организма. След това, IgM антитела изчезват. По този начин, присъствието на тези антитела се изисква незабавно възлага лечение.

При наличие на антитела Ig G, се появяват в тялото, след като лицето се е възстановил, и я задържа през цялото време, лечението не е необходимо поради факта, че те говорят само за този процес, придобита хронична форма. Антителата от този тип са един вид маркер, че пациент, един път пострада тази болест и е носител на живота.

Ако открити в биологичен материал и антитяло IgM, и Ig G, декодиране имуносорбентен анализ ще рече, че пациентът е екзацербация на хронично заболяване, което изисква подходяща терапия. Има и друг тип антитяло - Ig А, който разказва за острата фаза на болестта. Тези антитела се задържат в организма в продължение на 4-5 седмици и изчезват след възстановяване. Наличието на такива антитела показва, че пациентът е потенциален носител на заболяване.